賽分 Sepax HP-C18 液相色譜柱4.6mm×250mm 簡介

SRT SEC鍵合固定相采用表面修飾技術(shù)，通過在高純度具有良好機(jī)械穩(wěn)定性的硅膠基質(zhì)上，鍵合一層均勻的納米厚度中性親水薄膜而制備得到。工藝采用可控的化學(xué)修飾技術(shù)，因此能確保柱與柱之間有著可靠的重現(xiàn)性。SRT填料采用化學(xué)鍵合技術(shù)，表面親水涂層覆蓋，因此不僅具有優(yōu)異的穩(wěn)定性，而且對(duì)蛋白等生物樣品的非特異性吸附作用也非常小。精心設(shè)計(jì)的大孔體積可保證高的分離容量以及優(yōu)異的分辨率。由于采用創(chuàng)新的表面化學(xué)技術(shù)，以及擁有多種孔徑規(guī)格（從100?到2000?），SRT SEC柱可為各種分離應(yīng)用提供最高分辨率和最大回收率。應(yīng)用領(lǐng)域覆蓋了大分子量的生物分子（如蛋白質(zhì)、核酸）、小分子量的生物分子（如多肽、寡核苷酸）、天然聚合物（如多糖）、合成聚合物、生物細(xì)胞（如細(xì)菌和病毒）、納米材料（如納米顆粒）等。

特點(diǎn):

● 高柱容量、高分辨率
● 寬的pH范圍(pH范圍2-8.5)
● 使用壽命長
● 低鹽濃度洗脫，適合LC-MS分析
● 對(duì)于生物樣品無強(qiáng)吸附
● 極低的非特異性吸附，高的蛋白回收率及活性回收率
● 解決多維色譜分析應(yīng)用

賽分 Sepax HP-C18 液相色譜柱4.6mm×250mm

色譜柱的安裝和操作

色譜柱在運(yùn)輸過程中或在沒有使用時(shí)，它的兩端總是用 堵頭進(jìn)行密封。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí)，首先移去 兩端的堵頭。請(qǐng)注意將流動(dòng)相流動(dòng)的方向與柱上標(biāo)記的方向 保持一致。除非出于特殊考慮，例如為了清除堵在色譜柱入 口端的臟污等而需要將色譜柱反接以進(jìn)行沖洗時(shí)，建議用戶 在接上色譜柱時(shí)一定要遵循柱上標(biāo)記的方向。由于色譜柱的 連接是整個(gè)色譜操作過程的一部分，如果密封卡套過緊，或 安裝不合適，或者密封卡套與色譜柱端口不匹配，都有可能 導(dǎo)致溶液的泄漏。請(qǐng)按照下面步驟將色 ，從而將色譜柱接入 HPLC 系統(tǒng)： (a) 第一次使用的管線，請(qǐng)依次將管線接頭和密封卡套裝在 徑 1/16"的管線上。密封卡套的寬口端應(yīng)朝向管線接頭。 (b) 將管線緊緊插入色譜柱的接口，向前滑動(dòng)密封卡套和管 線接頭，并使管線接頭的 ，然后擰緊管線接頭。 (c) 在用力將管線壓入 螺帽再進(jìn)一步緊固。 ) 對(duì)色譜柱的另一端采用上述方法進(jìn)行操作。 新的 Sepax AAA 柱是置于甲醇（或乙腈）水溶液中運(yùn)輸 的，在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中，硅膠填料可能會(huì)干涸。這時(shí)推薦 用 10-20 倍柱體積的純有機(jī)溶劑如甲醇、乙腈進(jìn)行沖洗以活化色譜柱。接著可用用戶自己選擇的流動(dòng)相沖洗色譜柱。流 速由 0.1mL/min 逐漸升至所需的操作條件，直至基線穩(wěn)定為 止。如果柱壓和基線波動(dòng)較大，這可能是氣泡進(jìn)入了色譜柱中這時(shí)可用較高流速?zèng)_洗色譜柱 2-5 分鐘，例如對(duì)于 4.6x250 mm 的色譜柱可采用流速 1.5mL/min。

樣品和流動(dòng)相

為了避免色譜柱的堵塞，所有樣品和溶劑，包括緩沖溶 液在內(nèi)，都必須在使用前用 0.45 μm 或 0.2 μm 的濾膜過濾。 Sepax AAA 鍵合固定相的性質(zhì)為非極性，推薦流動(dòng)相為有機(jī) 試劑與水的混合物（如甲醇或乙腈的水溶液等）。流動(dòng)相在 使用前需要脫氣。一個(gè)簡單的脫氣方法是將流動(dòng)相在水泵形成的真空下超聲 5 min。當(dāng) Sepax AAA 柱用于梯度洗脫 時(shí)，起始流動(dòng)相通常為 5%甲醇（或乙腈）。

色譜柱的保護(hù)

pH 避免在 pH 低于 2 或高于 11 的條件下使用 Sepax AAA 柱。較高的 pH 會(huì)溶解硅膠，從而使部分或全部的烷基 鏈從硅膠表面脫落，引起分離效率的 。為了獲得最佳的分離效果和延長柱的使用壽命，請(qǐng)盡量 使用 pH 在 3 - 7.5 范圍內(nèi)的流動(dòng)相。

壓力 盡管 Sepax AAA 柱可在高至 5000psi 的壓力下使 用，但正常的操作壓力應(yīng)當(dāng)?shù)陀?3000psi。長時(shí)間在高壓下運(yùn) 行會(huì)損壞色譜柱。由于壓力來源于流速，因此最大 流速將受制于系統(tǒng)所能承受的壓力。一般而言，柱壓會(huì)隨著 色譜柱使用時(shí)間的增加而逐漸增加。壓力突然增加預(yù)示色譜柱入口端的篩板發(fā)生了堵塞。在這種情況下，建議將色譜柱 反接后用適宜的溶劑進(jìn)行沖洗。

溫度

最高操作溫度為 60o C。長時(shí)間在高溫(>75o C)下操作 也會(huì)損壞色譜柱，這種情形在高的pH (>8)條件下特別突出。

儲(chǔ)藏 長期不用時(shí)，請(qǐng)不要讓水或緩沖液存留在色譜柱 中。在替代緩沖液時(shí)，請(qǐng)用至少 20-30 倍柱體積的 50%甲醇 （或乙腈）水溶液沖洗色譜柱，再用 20-30 倍柱體積的純有機(jī)溶劑如已睛進(jìn)行沖洗。每根色譜柱在運(yùn)輸過程中均會(huì)附有 兩個(gè)可拆卸的堵頭。為了防止柱床干涸，請(qǐng)用堵頭塞緊色譜柱的兩端。